Изменение резистентности E.Coli к фторхинолонам на фоне применения ОМ-89 в составе комбинированной терапии у мужчин с хроническим простатитом в Ивановском регионе

ВВЕДЕНИЕ

Хронический простатит является одним из наиболее распространенных урологических заболеваний у мужчин. По данным Российских клинических рекомендаций и Национального института здравоохранения США, бактериальный простатит наиболее часто встречается не в виде категории I и II (NIH 1999), а в виде бессимптомной бактериоспермии (категория IV) или синдрома хронической тазовой боли (категории IIIА и IIIВ), когда отмечаются низкие титры микроорганизмов [1,2]. Распространенность бессимптомного простатита (категория IV) составляет примерно 10% всех случаев простатита, однако у 46,3% пациентов, идущих на программы вспомогательных репродуктивных технологий, также выявляется бессимптомная бактериоспермия [3, 4]. Представители семейства Enterobacteriaceae, особенно E. сoli, являются общепризнанными микроорганизмами, которые вызывают и поддерживают воспалительный процесс в предстательной железе [1, 2, 5]. Также энтеробактерии, в особенности E. сoli, имеют высокую склонность к образованию биопленок, что снижает эффективность антибактериальной терапии, способствует увеличению резистентности к антибактериальным препаратам, и приводит к бессимптомному носительству и неэффективности стандартной противомикробной терапии [2, 6–8]. Бактериальное воспаление в предстательной железе связано с усиленным синтезом коллагена, ишемией, оксидативным стрессом, что приводит к возникновению фиброза, в результате чего нарушается уродинамика нижних мочевых путей и репродуктивная функция [9]. В последние годы наблюдается рост выявляемости штаммов E. Coli с множественной лекарственной резистентностью [7, 10]. Согласно современным клиническим рекомендациям, для лечения всех категорий хронического простатита, в том числе при мужском факторе бесплодия, применяются антибактериальные препараты из группы фторхинолонов [2, 8]. В период пандемии SARS-COV2 во всем мире врачами активно применялись фторхинолоны, также отмечался самостоятельный и бесконтрольный прием антибактериальных средств среди населения [11–15]. По данным Всемирной организации здравоохранения, в связи с чрезмерным использованием антибактериальных препаратов, в том числе фторхинолонов, около 700 тыс. человек умирают ежегодно, а по прогнозам к 2050 г. число смертей может вырасти до 10 млн [16]. В последние годы рекомендовано включать в лечение хронического простатита неантибактериальные препараты, в частности ОМ-89 (Уро-Ваксом®) [2, 17].

Целью нашего исследования было проанализировать изменение резистентности и встречаемости E. сoli к фторхинолонам до и после пандемии SARS-COV2. 

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Ретроспективно проанализированы бактериологические анализы эякулята в «доковидный» (с 2015 по 2018 г.) и в «постковидный» (с 2021 по 2024 г.) периоды у пациентов, которые обратились с целью прегравидарной подготовки по причине бесплодия, повышения уровня простатспецифического антигена, изменений в анализах мочи, выявленных на профилактическом осмотре или по направлению гинеколога при выявлении воспалительных заболеваний у супруги. Для исключения урогенитальной инфекции на базе бактериологической лаборатории противотуберкулезного диспансера имени М.Б. Стоюнина в г. Иваново всем пациентам был проведен бактериологический анализ эякулята. В 2020 г. бактериологический анализ эякулята не выполнялся в связи с особым режимом работы противотуберкулезного диспансера в период пандемии SARS-COV2.

Критериями исключения из обследования были: применение антибактериальных, противовирусных и иммунотропных препаратов в последние четыре недели до обследования. Кроме того, из исследования исключались пациенты, в историях болезни которых отмечалось нарушение уродинамики, связанное с обструкцией и/или нейрогенной дисфункцией мочевого пузыря.

Забор эякулята проводился в стерильные пробирки с транспортной средой, которые были доставлены в лабораторию в течение 1–2 ч от момента забора. Бактериологический анализ спермы и определение чувствительности к антибактериальным препаратам выполнялся на базе бактериологической лаборатории противотуберкулезного диспансера имени М.Б. Стоюнина в г. Иваново.

Бактериологический анализ эякулята осуществляли методом посевов по Голду–Родоману на чашках Петри с кровяным агаром, а также средах Эндо и Сабуро. По окончании инкубации проводили количественный учет, идентификацию и определение концентрации микроорганизмов. В исследование вошли пациенты, у которых по данным бактериологического анализа выявлялась E. сoli. Под значимым титром штаммов E. сoli считали 1000 КОЕ/мл и более.

Оценку резистентности E. сoli к антибактериальным препаратам из группы фторхинолонов проводили стандартным методом диффузии веществ в агар. При определении чувствительности исследуемых бактериальных культур диско-диффузионным методом на поверхность агара в чашке Петри наносили бактериальную суспензию, затем помещали бумажные диски диаметром 6 мм, содержащие определенное количество антибактериальных препаратов. После инкубации чашек в течение суток в термостате при температуре 37 °С измеряли диаметры зон подавления роста клеток вокруг дисков. В качестве антибактериальных препаратов оценивали основные фторхинолоны: офлоксацин, ципрофлоксацин, ломефлоксацин, норфлоксацин, спарфлоксацин. С 2024 г. в антибиотикограмму был добавлен моксифлоксацин. Антибиотикорезистентность микроорганизмов определялась в соответствии с критериями Европейского комитета по определению чувствительности к антимикробным препаратам (EUCAST) по диаметру зон подавления их роста на агаризованной среде и оценивалась следующим образом: при диаметре зоны ингибирования роста 21 мм и более микроорганизмы считались чувствительными, от 1 до 20 мм – индифферентными, при отсутствии зоны подавления роста их расценивали, как устойчивые формы [2]. Статистический анализ проведен с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel 2023 и Statistica 12.0 (StatSoft, Inc.). Значимость различий показателей считали по критерию Крускала-Уоллиса, Фишера и методу множественной регрессии. Различия считали достоверными при p<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

За последние 10 лет было выявлено 3511 штаммов микроорганизмов, E. сoli из которых составила 303 (8,6%). В «доковидный» период с 2015 по 2018 г. было выявлено 2826 штаммов, из которых 259 (9,2%) идентифицированы как E. сoli. В «постковидный» период с 2021 по 2024 было выявлено 685 штаммов, при этом 43 (6,3%) принадлежали к E. сoli (табл. 1).

На рис. 1 отражена динамика изменения встречаемости E. сoli в «доковидный» и «постковидный» периоды. Наблюдается статистически значимое снижение частоты встречаемости E. сoli за последние 10 лет (p<0,05).

 
Рис 1. Изменение выявляемости E. сoli в периоды с 2015 по 2024 гг. По оси абсцисс – годы, по оси ординат – % выявляемости E. сoli за год  
Fig 1. Change in E. сoli detection rates in the periods from 2015 to 2024. The abscissa axis shows years, the ordinate axis shows the % of E. сoli detection rates per year

На рис. 2 виден наметившийся тренд увеличения значимых титров штаммов E. сoli за последние 10 лет, в отдельные года достигающий 100%, однако данные изменения статистически не значимы (p>0,05).

 
Рис. 2. Выявляемость значимых титров штаммов E. сoli в период с 2015 по 2024 г. По оси абсцисс – годы, по оси ординат % значимых титров штаммов E. сoli  
Fig 2. The detection of significant titers of E. сoli strains between 2015 and 2024. On the abscissa axis are years, on the ordinate axis is % of significant titers of E. сoli strains

В период с 2015 по 2018 г. и с 2021 по 2024 г. всего было выявлено 302 штамма E. сoli. Чувствительность, индифферентность и резистентность E. сoli к основным препаратам из группы фторхинолонов представлена в табл. 2 и 3.

Резистентность E. сoli к большинству фторхинолонов с 2015 по 2017 г. была стабильной, статистически незначимой год к году (p>0,05) и составила: к офлоксацину – от 5,5 до 6,7%, к ципрофлоксацину – от 6,7 до 12,4%, к ломефлоксацину – от 8,9 до 10,1%, к норфлоксацину – от 6,8 до 8,8%, к спарфлоксацину – от 5,9 до 6,7%. Резистентность E. сoli статистически значимо (p<0,05) увеличилась в «постковидный» период и достигла пика в 2022 г.: к офлоксацину – с 7,7 до 57,1%, к ципрофлоксацину – c 7,7 до 42,9%, к ломефлоксацину – c 7,7 до 30%, к норфлоксацину – c 23,1 до 42,9%, к спарфлоксацину – c 7,7 до 40%. В 2024 г., по сравнению с предыдущими «постковидными» годами, отмечалось снижение резистентных штаммов, устойчивость сохранялась на следующем уровне: к офлоксацину – 38,5%, к ципрофлоксацину – 30,8%, к ломефлоксацину – 16,7%, к норфлоксацину – 33,3%, к спарфлоксацину – 25%.

Таблица 1. Встречаемость E. сoli в эякуляте в «доковидный» и «постковидный» периоды 
Table 1. Prevalence of E. сoli in ejaculate in the pre-COVID and post-COVID periods

Таблица 2. Распределение чувствительных (S), индифферентных (I) и резистентных (R) штаммов E.Сoli в период с 2015 по 2018 г. 
Table 2. Distribution of sensitive (S), indifferent (I) and resistant (R) E. сoli strains from 2015 to 2018

Таблица 3. Распределение чувствительных (S), индифферентных (I) и резистентных (R) штаммов E. сoli в период с 2021 по 2024 г. 
Table 3. Distribution of sensitive (S), indifferent (I) and resistant (R) E. сoli strains from 2021 to 2024.

Динамика изменения чувствительности E. сoli в периоды с 2015 по 2018 г. и с 2021 по 2024 г. представлена на рис. 3. Она имеет общий тренд и совпадает по всем фторхинолонам.

 
Рис. 3. Динамика изменения чувствительности E. сoli к фторхинолонам в период с 2015 по 2024 г. По оси абсцисс – годы, по оси ординат – % чувствительных штаммов E. сoli к антибактериальному препарату.  
Fig. 3. Dynamics of changes in E. сoli sensitivity to fluoroquinolones between 2015 and 2024. The abscissa axis shows years, the ordinate axis shows the % of E. сoli sensitive to the antibacterial drug

В доковидный период чувствительность E. сoli росла ко всем представленным фторхинолонам с 2015 по 2017 гг. включительно, так как в этот период времени антибактериальные препараты данной группы практически не использовались в качестве эмпирической терапии у этой категории пациентов [18–20]. В постковидный период наблюдалось резкое падение чувствительности E. сoli к фторхинолонам в связи с их массовым использованием в Ивановском регионе, связанным с пандемией SARS-COV2 (рис. 3, 4).

Обращает внимание динамика изменения процента устойчивых штаммов E. сoli в «доковидный» и «постковидный» периоды (рис. 4). В 2017 г. устойчивость E. сoli ко всем представленным фторхинолонам была ниже 10%, а начиная с 2018 г. наблюдалось ее значительное повышение в связи с уменьшением использования в комбинированной терапии ОМ-89 (Уро-Ваксом®). В «постковидный» период наблюдался резкий рост устойчивости E. сoli ко всем фторхинолонам, достигший пика в 2022 г., когда уровень резистентности доходил до 57%. Начиная с 2022 г., в лечении хронического простатита в составе комбинированной терапии вновь стал активно применяться ОМ-89 (Уро-Ваксом®), что привело к снижению резистентных штаммов E. сoli (рис. 4).

 
Рис. 4. Динамика изменения устойчивых штаммов E. сoli к фторхинолонам в период с 2015 по 2024 г. По оси абсцисс – годы, по оси ординат – % устойчивых штаммов E. сoli к антибактериальному препарату  
Fig. 3. Dynamics of change in resistant E. сoli strains to fluoroquinolones in the period from 2015 to 2024. On the abscissa – years, on the ordinate – % of resistant E. сoli strains to an antibacterial drug

Особый интерес представляет моксифлоксацин, один из современных фторхинолонов, к которому на данный момент не выявлено резистентных штаммов. При исследовании чувствительности E. сoli к этому препарату среди 5 протестированных штаммов не было обнаружено ни одного резистентного, все (100%) показали чувствительность.

ОБСУЖДЕНИЕ

Проанализированные данные демонстрируют, что в «доковидный» период резистентность E. сoli к фторхинолонам уменьшалась в период с 2015 по 2017 гг. включительно, а начиная с 2018 г. наблюдалось снижение чувствительности. На наш взгляд, данная тенденция связана с тем, что в период с 2015 по 2017 гг. в качестве основной терапии хронического простатита использовались неантибактериальные схемы лечения, включающие ОМ-89 (Уро-Ваксом®) в комбинации с бовгиалуронидаза азоксимером или простатопротекторами [18–20]. С 2018 г. в связи с восстановлением чувствительности в схемы лечения активно начали включаться антибактериальные препараты из группы фторхинолонов и реже использовался в комбинированной терапии ОМ-89 (Уро-Ваксом®), что сразу привело к увеличению резистентных штаммов E. сoli.

В «постковидный» период наблюдалось стремительное увеличение резистентности E. сoli к фторхинолонам. Массовое применение фторхинолонов в популяции мужчин Ивановского региона способствовало увеличению селекции резистентных штаммов E. сoli и значительному снижению их чувствительности к антибиотикам из группы фторхинолонов.

Стоит обратить внимание на то, что процент значимых титров штаммов E. сoli достиг пика в 2018 г. и сохранял стабильно высокие значения в период с 2022 по 2024 гг., что напрямую связано с активным использованием фторхинолонов и повышением в следствие этого к ним резистентности.

Снижение выявляемости штаммов E. сoli, но увеличение значимых титров штаммов E. сoli в «постковидный» период по сравнению с «доковидным» мы связываем с тем, что предварительно пациентам выполнялся метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени (Андрофлор), и только при выявлении данной методикой энтеробактерий выполнялся бактериологический анализ эякулята, что исключало ложноположительные бактериологические посевы.

Начиная с 2023 г., в терапии простатита чаще стали использовать ОМ-89 (Уро-Ваксом®), что позволило увеличить количество чувствительных штаммов E. сoli к 2024 г.

На наш взгляд, необходимо начинать лечение хронического простатита, особенно в виде бессимптомной бактериоспермии (хронический простатит категории IV), с неантибактериальных схем, которые доказали свою эффективность в период с 2015 по 2017 гг. [18–20].

Наш опыт использования неантибактериальных схем лечения, особенно ОМ-89 (Уро-Ваксом®), позволяет влиять на восстановление чувствительности штаммов E. сoli к фторхинолонам [18–20]. При этом стоит отметить, что применение неантибактериальных средств не привело к увеличению встречаемости E. сoli.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В период пандемии SARS-COV2 увеличение использования антибактериальных препаратов в Ивановском регионе привело к увеличению резистентных штаммов E. сoli к фторхинолонам у мужчин.

Неутешительные прогнозы Всемирной Организации Здравоохранения подчеркивают критическую важность снижения использования этой группы антибактериальных препаратов в схемах эмпирической терапии урологических заболеваний и применение их только в случаях подтвержденной чувствительности штаммов.

Наш опыт применения неантибактериальных схем лечения, в особенности ОМ-89 (Уро-Ваксом®), дает возможность восстановления чувствительности и уменьшения количества резистентных штаммов E. сoli к фторхинолонам.

Ограничение использования фторхинолонов в лечении хронического простатита, особенно в виде бессимптомной бактериоспермии (хронический простатит категории IV) и активное включение в схемы терапии неантибактериальных средств способствует снижению селекции резистентных штаммов микроорганизмов и сохранению антибактериальных препаратов фторхинолонового ряда в лечении более тяжелых случаев.

ЛИТЕРАТУРА

1. Перепанова Т.С., Козлов Р.С., Кулабухов В.В., Палагин И.С. Антимикробная терапия и профилактика инфекций почек, мочевыводящих путей и мужских половых органов. Клинические рекомендации. Екатеринбург: Уромедиа; 2025. 116 с. [Perepanova TS, Kozlov RS, Kulabukhov VV, Palagin IS. Antimicrobial therapy and prevention of infections of the kidneys, urinary tract and male genital organs: Clinical guidelines. Yekaterinburg: Uromedia; 2025. 116 p. (In Russian)].
2. Krieger JN, Nyberg LJr, Nickel JC. NIH consensus definition and classification of prostatitis. JAMA. 1999;282(3):236–7. https://doi.org/10.1001/jama.282.3.236.  
3. Ricci S, De Giorgi S, Lazzeri E, Luddi A, Rossi S, Piomboni P, et al. Impact of asymptomatic genital tract infections on in vitro Fertilization (IVF) outcome. PLoS One. 2018;13(11):e0207684. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0207684.  
4. Magri V, Boltri M, Cai T, Colombo R, Cuzzocrea S, De Visschere P, et al. Multi-disciplinary approach to prostatitis. Arch Ital Urol Androl. 2019;90(4):227–48. https://doi.org/10.4081/aiua.2018.4.22.  
5. Cai T, Alidjanov J, Palagin I, Medina-Polo J, Nickel JC, Wagenlehner FME. Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS): look to the future. Prostate Cancer Prostatic Dis. 2024;27(2):239–41. https://doi.org/10.1038/s41391-023-00645-7.
6. Тризна Е.Ю., Байдамшина Д.Р., Виницкий А.А., Каюмов А.Р. Влияние in vitro изолированного и сочетанного с антибактериальными средствами применения бовгиалуронидазы азоксимер на целостность бактериальной био-пленки и жизнеспособность микроорганизмов. Экспериментальная и  клиническая фармакология. 2020;83(2):38–44. [Trizna EYu, Baidamshina DR, Vinitskii AA, Kayumov AR. Effect of in vitro isolated and combined with antibacterial agents use of bovhyaluronidase azoximer on bacterial biofilm integrity and microorganism viability]. Eksperimental'naia i klinicheskaia farmakologiia = Experimental and Сlinical Рharmacology. 2020;83(2):38–44. (In Russian)]. https://doi.org/10.30906/0869-2092-2020-83-2-38-44. 
7. Ядыкова Л.Л., Зыкова Д.А., Баязитова Л.Т., Тризна Е.Ю. Сопоставление ге-нетических маркеров резистентности и фенотипического профиля устойчивости к антимикробным препаратам у клинических изолятов Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae. Биомика. 2024;16(4):369–80. [Yadykova L.L., Zykova D.A., Bayazitova L.T., Trizna E.Yu. Comparison of genetic resistance markers and phenotypic antimicrobial resistance profiles in clinical isolates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. Biomika=Biomica. 2024;16(4):369–80. (In Russian)]. https://doi.org/10.31301/2221-6197.bmcs.2024-26.
8. Minhas S, Boeri L, Capogrosso P, Cocci A, Corona G, Dinkelman-Smit M, et al. European Association of Urology Guidelines on Male Sexual and Reproductive Health: 2025 Update on Male Infertility. Eur Urol. 2025;87(5):601–16. https://doi.org/10.1016/j.eururo.2025.02.026.
9. Зайцев А.В., Пушкарь Д.Ю., Ходырева Л.А., Дударева А.А. Бактериальный простатит и фиброз простаты: современный взгляд на лечение и профилактику. Урология. 2016;(4):114–20. [Zaitsev AV, Pushkar' DU, Khodyreva LA, Dudareva AA. Bacterial prostatitis and prostate fibrosis: a modern view of treatment and prevention. Urologiya = Urologiia. 2016;(4):114–20. (In Russian)]. 
10. Котов С.В., Пульбере С.А., Беломытцев С.В. и др. Антибиотикорезистентность – новый вызов современной урологии. Экспериментальная и клиническая урология. 2020;13(5):113–9. [Kotov S.V., Pul'bere S.A., Belomytcev S.V., et al. Antibiotic resistance - a new challenge for modern urology. Eksperimental'naya i klinicheskaya urologiya = Experimental and Сlinical Urology. 2020;13(5):113–9. (In    
    Russian)]. https://doi.org/10.29188/2222-8543-2020-13-5-113-119. 
11. Karampela I, Dalamaga M. Could Respiratory Fluoroquinolones, Levofloxacin and Moxifloxacin, Prove to be Beneficial as an adjunct treatment in COVID-19? Arch Med Res. 2020;51(7):741–2. https://doi.org/10.1016/j.arcmed.2020.06.004.
12. Yadav V. Computational evidence based perspective on the plausible repositioning of fluoroquinolones for COVID-19 Treatment. Curr Comput Aided Drug Des. 2022;18(6):407–13. https://doi.org/10.2174/1573409918666220909094645.  
13. Getahun H, Smith I, Trivedi K, Paulin S, Balkhy HH. Tackling antimicrobial resistance in the COVID-19 pandemic. Bull World Health Organ. 2020;98(7):442–442A. https://doi.org/10.2471/BLT.20.268573. 
14. Sulayyim HJA, Ismail R, Hamid AA, Ghafar NA. Antibiotic Resistance during COVID-19: A Systematic Review. Int J Environ Res Public Health. 2022;19(19):11931. https://doi.org/10.3390/ijerph191911931.  
15. Захаренкова П.В., Рачина С.А., Козлов Р.С., и др. Влияние пандемии COVID-19 на практику применения антибиотиков без рецепта врача. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2023;25(S1):24–5. [Zakharenkova P.V., Rachina S.A., Kozlov R.S., et al. The impact of the COVID-19    
    pandemic on the practice of using antibiotics without a doctor's prescription. Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya khimioterapiya = Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. 2023;25(S1):24–5. (In Russian)].
16. GBD 2021 Antimicrobial Resistance Collaborators. Global burden of bacterial antimicrobial resistance 1990-2021: a systematic analysis with forecasts to 2050. Lancet. 2024;404(10459):1199–226. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(24)01867-1.
17. Wagenlehner FM, Ballarini S, Naber KG. Immunostimulation in chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS): a one-year prospective, double-blind, placebo-controlled study. World J Urol. 2014c;32(6):1595–603. https://doi.org/10.1007/s00345-014-1247-z.
18. Почерников Д.Г., Яковлева Л.В., Стрельников А.И., и др. Опыт применения лиофилизированного лизата бактерий E. Coli ОМ-89 (Уро-Ваксом®) у мужчин при асимптомной бактериоспермии. Урология. 2015;(4):84–9. [Pochernikov D.G., Yakovleva L.V., Strel'nikov A.I., et al. Experience with the use of lyophilized bacterial lysate of E. Coli OM-89 (Uro-Vaxom®) in men with asymptomatic bacteriospermia. Urologiуa = Urologiia. 2015;(4):84–9 (In Russian)]. https://doi.org/10.17650/2070-9781-2019-20-2-40-47.
19. Почерников Д.Г., Постовойтенко Н.Т., Яковлева Л.В., и др. Сравнительный анализ выявляемости микроорганизмов в секрете предстательной железы и эякуляте по результатам бактериологического анализа. Андрология и генитальная хирургия. 2021;22(1):43–51. [Pochernikov D.G., Postovoytenko N.T.,    
    Yakovleva L.V., et al. Comparative analysis of microorganism detection in prostate secretion and ejaculate based on bacteriological analysis results. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology and genital surgery. 2021;22(1):43-51. (In Russian)]. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2021-22-1-43-51.
20. Почерников Д.Г., Постовойтенко Н.Т., Стрельников А.И. Сравнительный анализ культурального и молекулярно-генетического методов в исследовании микробиоты эякулята при мужской инфертильности. Андрология и генитальная хирургия. 2019;20(2):40–7. [Pochernikov D.G., Postovoytenko N.T., Strel'nikov A.I. Comparative analysis of cultural and molecular genetic methods in the study of ejaculate microbiota in male infertility. Andrologiya i genital'naya khirurgiya = Andrology and genital surgery. 2019;20(2):40–7. (In Russian)]. https://doi.org/10.17650/2070-9781-2019-20-2-40-47.